細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
兔直腸黏膜上皮分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以門而終。直腸上端的大小似結腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細接管。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。
方法簡介:
實驗室分離的兔直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔直腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 直腸 | 產品貨號 | YS-01X8481 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔直腸黏膜上皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠黃體生成素(LH)試劑盒 ,英文名: LH ELISA Kit
Rabbit cyclic adenosine monophosphate (cAMP) ELISA Kit 兔環0酸腺苷(cAMP)試劑盒
腦膜奈瑟菌C群(NM-C)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMouseLysozyme,LZMELISAKit小鼠
體液過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitOH人25羥基D3
乙酰酯酶(T-CHE)檢測 Acetylcholine ansferase (ChAT) detection
乙酰轉移酶(ChAT)檢測 Detection of the ache of the choline
丁酰酯酶檢測 Glucose -6- phosphate dehydrogenase (G-6-PD) detection
葡萄糖-6-0酸脫氫酶(G-6-PD)檢測 BN N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE (NAG) detection
突觸融合蛋白1A/1B抗體
G蛋白偶聯受體10抗體
TNF重組小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein
CCR-6/CD196 peptide 細胞表面趨化因子受體6抗原 0.5mgCCR-6/CD196 peptide 細胞表面趨化因子受體6抗原
CNTN4重組人 Contactin 4 / CNTN4 蛋白 (His 標簽) Protein
CA7 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VII / CA7 蛋白 (His 標簽)
IL22RA2 Protein Rat 重組大鼠 IL22BP / L22RA2 蛋白
CCR-6/CD196 peptide 細胞表面趨化因子受體6抗原 0.5mgCCR-6/CD196 peptide 細胞表面趨化因子受體6抗原
CA7 Protein Human 重組人 Carbonic Anhydrase VII / CA7 蛋白 (His 標簽)
TNF重組小鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白 Protein
IL22RA2 Protein Rat 重組大鼠 IL22BP / L22RA2 蛋白
CNTN4重組人 Contactin 4 / CNTN4 蛋白 (His 標簽) Protein
兔直腸黏膜上皮細胞鴨子乙酰羧化酶(ACC)試劑盒
Human ai ovary aibody (AOAb) ELISA Kit 人抗卵巢抗體(AOAb)試劑盒
HumanVitaminB6,VB6ELISAKit 人B6(VB6)試劑盒分裝
CLIAKitforADAM8(HumanADisiegrinAndMetalloprotease8)ELISAKit人解整合素樣金屬蛋白酶8
血液總氨基酸含量比色法定量試劑盒20次
MouseP-SelectinELISAKit小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)試劑盒
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取