細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔棕色前脂肪分離自棕色脂肪組織；動(dòng)物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪，白色脂肪堆積在皮下，負(fù)責(zé)儲(chǔ)存多余熱量；棕色脂肪負(fù)責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪，將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳、水和熱量，本身不儲(chǔ)存熱量。棕色脂肪組織呈棕色，其特點(diǎn)是組織中有豐富的毛細(xì)血管，脂肪細(xì)胞內(nèi)散著許多小脂滴，線粒體大而豐富，核圓形，位于細(xì)胞中央，這種脂肪細(xì)胞也稱為多泡脂肪細(xì)胞。棕色脂肪組織在成年動(dòng)物極少，新生兒及冬眠動(dòng)物較多，在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時(shí)期發(fā)揮作用，它們堆積在新生兒肩胛處，幫助維持體溫。隨著年齡增長(zhǎng)，棕色脂肪會(huì)逐漸消失。終，動(dòng)物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細(xì)胞，分布于頸部和鎖骨。脂肪組織在體內(nèi)含有兩種主要的細(xì)胞：一種是在胞漿內(nèi)積聚脂滴的成熟脂肪細(xì)胞；另一種是雖未在胞漿內(nèi)積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細(xì)胞呈圓形，已經(jīng)失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細(xì)胞是一類具有增殖和向脂肪細(xì)胞分化能力的特異化前體細(xì)胞，與肥胖有著非常密切的關(guān)系。前脂肪細(xì)胞是一種類成纖維細(xì)胞，在演變的過(guò)程中不斷吸收脂質(zhì)，終成為成熟的脂肪細(xì)胞。前脂肪細(xì)胞對(duì)外界機(jī)械損傷的抵抗力較強(qiáng)，可望成為軟組織缺損的有益填充物。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔棕色前脂肪采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔棕色前脂肪經(jīng)油紅O染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來(lái)源 | 脂肪 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8488 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔棕色前脂肪體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠促甲狀腺激素(TSH)試劑盒 ，英文名： TSH ELISA Kit
Mouse procollagen C N-terminal peptide (C I CP) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒
ELISA 小鼠皮質(zhì)酮(mouse Coicosterone) 分裝
CLIAKitforLH(Humanleoopichormone)ELISAKit
通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitPF-4/CXCL4血小板因子4
小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)試劑盒
小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒
小鼠抗IVIgG抗體試劑盒
富含半胱與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體
FSP-1抗體
EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein
CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原
PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標(biāo)簽) Protein
CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白
TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白
CA125 卵巢癌抗原 0.2mgCA125 卵巢癌抗原
CUTC Protein Human 重組人 CUTC / CGI-32 蛋白
EFNB2重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 Protein
TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白
PON3重組人 PON3 / Paraoxonase 3 蛋白 (50 Ser/Asn, His 標(biāo)簽) Protein
兔棕色前脂肪細(xì)胞小鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Human glucose 6 phosphate isomerase (GPI) ELISA Kit 人葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒
Humanliverspecificlipoprotein,LSPELISAKit 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
Humanacidicfibroblastgrowthfactor1,aFGF-1試劑盒人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1(aFGF-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
脂肪肝比色法定量試劑盒
MouseannexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
