細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
兔子宮頸上皮分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部，近似圓錐體，上端與子宮體相連，下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部，在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔，其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連，其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化；宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病，包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的兔子宮頸上皮采用膠原酶消化法，結合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的tu子宮頸上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 子宮 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8485 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔子宮頸上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠雌一醇(E1)試劑盒 ，英文名： E1 ELISA Kit
Mouse 25 hydroxyvitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA Kit 小鼠25羥基3(25(OH)試劑盒D3/25 HVD3)試劑盒
ELISA 小鼠結締組織生長因子(mouse CTGF) 分裝
CLIAKitforLHELISAKit大鼠促黃體激素
通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitADM腎上腺髓質(zhì)素
鐵測試盒 Iron test case
錳測試盒 Manganese test case
鎳測試盒 Nickel test case
鹽快速測試盒 Niate rapid test case
富含脯突觸相關蛋白SHANK1抗體
GRWD1蛋白抗體
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標簽) Protein
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標簽) Protein
兔子宮頸上皮細胞小鼠15-脂氧合酶(15-LOX)pcr檢測試劑盒
Human Pro gasin releasing peptide (ProGRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒
HumanPeosidineELISAKit 人戊糖素(Peosidine)pcr檢測試劑盒分裝
HumanCoxsackievirusIgM,CoxV-IgM試劑盒人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit人蛋白二硫化物異構酶A3(PDIA3)試劑盒規(guī)格：96T/48T
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取
