1.產品名稱：小鼠視網膜神經節細胞實驗方法

2.組織來源：視網膜組織

3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

小鼠視網膜神經節細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。*神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處zui多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面，經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力zui強。視網膜神經節細胞貼壁后呈單層排列，部分細胞聚集成團，細胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對透明，有些細胞膜上伸出短而小的突起；該細胞為高度分化細胞，在體外屬于不增殖群。視網膜神經節細胞是青光眼病理性損害的主要細胞，視網膜神經節細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷，研究視網膜神經節細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發病機制的研究。

本公司的小鼠視網膜神經節細胞采用*-膠原酶聯合消化法，結合視網膜神經節細胞培養基培養和化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經CD90、MAP-2免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養基信息：

Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
大鼠抗核膜糖蛋白210抗體 
小鼠腎上腺髓質素 
大鼠可溶性Toll樣受體6 
人血管內皮細胞生長因子D 
人血管內皮細胞生長因子C 
大鼠可溶性Toll樣受體2 
小鼠可溶性瘦素受體 
人血管內皮細胞生長因子B 
大鼠前列腺素F2α 
小鼠β內啡肽受體 
人血管內皮細胞生長因子 
大鼠白三烯E4 
小鼠肝脂酶 
大鼠* 
人血管內皮細胞粘附分子1 
小鼠乙型肝炎核心抗體 
小鼠乙型肝炎e抗體 
大鼠*Ⅻ 
人可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體 
人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4 
小鼠乙型肝炎e抗原 
大鼠*ⅩⅢ 
大鼠*Ⅲ 
人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3 
小鼠乙型肝炎表面抗體 
小鼠二胺氧化酶 
大鼠載脂蛋白H 
人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1 
人腫瘤壞死因子β 
小鼠乙型肝炎表面抗原 
大鼠白介素2受體 
人可溶性Endoglin 
人腫瘤壞死因子α 
大鼠腎上腺髓質素 
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ 
大鼠β內啡肽受體 
小鼠活化蛋白C 
TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby)ELISA Kit  小鼠抗促甲狀腺素受體抗體   48T
CA(Mouse catecholamine)ELISA Kit  小鼠兒茶酚胺   48T
IL-27(Mouse Interleukin 27)ELISA Kit  小鼠白介素27   48T
IL-23(Mouse Interleukin 23)ELISA Kit  小鼠白介素23   48T
CT-1(Mouse cardiotrophln 1)ELISA Kit  小鼠心肌營養素1   48T
Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit  小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA   48T
AT- III (Mouse Anti-Thrombin III )ELISA Kit  小鼠抗*Ⅲ抗體   48T
NP-Y(Mouse neuropeptide Y) ELISA Kit  小鼠神經肽Y   48T
GHRP(Mouse Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit  小鼠生長激素釋放多肽   48T
Gelsolin(Mouse Gelsolin ) ELISA Kit  小鼠凝溶膠蛋白   48T
RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit  小鼠核因子κB受體活化因子配基   48T
TpP(Mouse thrombus precursor protein) ELISA Kit  小鼠血栓前體蛋白   48T
GnRH(Mouse gonadotropin-releasing hormone) ELISA Kit  小鼠*釋放激素   48T
INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit  小鼠抑制素B   48T
TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit  小鼠促甲狀腺素釋放激素   48T
CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit  小鼠促腎上皮質激素釋放激素   48T
ISR- Beta(Mouse Insulin Receptor Beta) ELISA Kit  小鼠胰島素受體β   48T