【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

1.產品名稱：小鼠牙齦上皮細胞操作步驟

2.組織來源：牙齦組織

3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

小鼠牙齦上皮細胞分離自牙齦組織；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色、有光澤、質堅韌。牙齦邊緣稱為齦緣，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦，通稱牙床；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色，內有很多血管和神經。牙齦上皮*被認為是抵御口腔中持續存在的細菌的被動免疫屏障，隨著對牙周致病菌的不斷認識，發現牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障，上皮細胞還可以分泌抗菌多肽，參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的*道屏障，在抵御牙周炎細菌入侵的過程中發揮了重要作用，建立正常牙齦上皮細胞體外培養體系，將為各種牙齦上皮相關的研究提供穩定的實驗模型。

本公司的小鼠牙齦上皮細胞采用*-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經Cytokeratin-18/PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.培養基信息：

M199、FBS、上皮細胞生長添加劑、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等

冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
操作步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
優勢：
1、細胞株種類齊全，包括腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株，如：人滑膜細胞，人胃癌細胞，人細胞，人腎近曲小管上皮細胞，肝癌細胞，心肌細胞，子宮內膜細胞等
2、*，專業的細胞培養技術指導
3、購買本公司的細胞株，免費復蘇
4、客戶收到細胞后一天回傳細胞圖片，三天回傳細胞生長狀態圖片，五天內有問題公司負責重發，超過五天時限至一個月內重發細胞收半價，超過一個月重發全額收費。
5、經濟、實惠、可靠，完善、穩定的實驗體系，優秀的科研隊伍，*的實驗設備、準確可靠的實驗結果，是您可靠的合作伙伴
6、此外，我們還可以提供Elisa試劑盒、細胞株、抗體、血清、培養基、常用生化試劑、耗材。
5-羥色胺受體2A抗原 NF-H(Neurofilament triplet H)
*Ⅱ(*II)抗原 NIS(Na+/I-symporter;NIS)
5-羥色胺受體3抗原 NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB)
5-羥色胺受體4抗原 NR2A (Glutamate receptor2A)
粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原 NRP-1(neuropilin-1)
整合素樣金屬蛋白酶與*1型-7抗原 NRP-2(neuropilin-2)
血管緊張素原（抗原） NSBP1(Nucleosome-binding protein 1)
5-脂氧合酶抗原 NTP，Neurual thread protein
辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與*1型-7抗原 OAT-1 (Organic anion transporter 1)human
載脂蛋白E（抗原） OAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat
 OAT-3(Organic anion transporter 3)
整合素連接激酶-1 galectin 9
芳香化酶（抗原） 4-Oct
肺表面活性蛋白C抗原 OPN(osteopontin)
肥大細胞類*1 P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A)
銅藍蛋白抗原 p21/WAF1/CIP1
趨化素樣蛋白 p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B)
 P63 protein
細胞凋亡關聯*激酶抗原 OPG(Osteoprotegerin)
水通道蛋白-2（抗原） OPGL (Osteoprotegerin ligand)
腺苷三磷酸結合盒轉運體A1抗原 P311 protein
組織因子途徑抑制劑 PARP(poly ADP-ribose polymerase)
葡萄糖轉運蛋白12 Visfatin-1 (PBEF1)(NT)
3   48T
human major vault protein,MVP ELISA Kit  人主要穹窿蛋白   48T
human ubiquitin D,UBD ELISA Kit  人泛素蛋白D   48T
human toll-like receptor 2,TLR2 ELISA Kit  人toll樣受體2   48T
human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 ELISA Kit  年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關蛋白2   48T
human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit  人卷曲蛋白8   48T
human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit  人蝸牛同源物2   48T
Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit  人高爾基蛋白73   48T
Human TU3A Protein ELISA Kit  人TU3A蛋白   48T
Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit  人電子轉移黃素蛋白β肽   48T
Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit  人皮膚蛋白   48T
Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit  人可溶性蛋白185   48T
Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit   人降解加速因子   48T
Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit  人T細胞活化連接蛋白   48T
Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit  人SH2攜帶蛋白   48T
Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit  人B細胞連接蛋白   48T
Human urease related protein C,UreC ELISA Kit  人尿素酶相關蛋白C   48T
Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit  人銜接蛋白酶活化因子1   48T
Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit  人錨蛋白B   48T