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棉花組織RNA的提取是進(jìn)行棉花分子生物學(xué)研究的必要前提。進(jìn)行Northern雜交分析、體外翻譯、建立cDNA文庫(kù)、RT2PCR及差異顯示分析等研究都需要高質(zhì)量的RNA(李宏和王新力,1999;趙雙宜等...
收集細(xì)胞，離心5000r/min，5分鐘，棄上清，加入異硫氰酸胍變性液（異硫氰酸胍4mol/L；檸檬酸鈉25mmol/L，Sarkosy10.5%,β-巰基乙醇0.1mol/L）500ml，混勻，振蕩...
摘要:長(zhǎng)PCR(longPCR)技術(shù)自1994年發(fā)明以來(lái),在生命科學(xué)發(fā)展中發(fā)揮了巨大的作用。長(zhǎng)PCR技術(shù)與常規(guī)PCR有較大的區(qū)別。本文從長(zhǎng)PCR技術(shù)的由來(lái)、長(zhǎng)PCR技術(shù)對(duì)模板、引物和聚合酶的特殊要求及...
分類和進(jìn)化研究是生物學(xué)中zui古老的領(lǐng)域之一。過(guò)去的研究主要依靠生物體的形態(tài)，并輔以生理特征，來(lái)探討生物間親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近，有人稱之為經(jīng)典的方法，它是一百多年來(lái)完成微生物分類的主要方法。經(jīng)典的方法是隨機(jī)...
單個(gè)二倍體細(xì)胞在分析單精子以前，Li等人對(duì)個(gè)體二倍體細(xì)胞內(nèi)的β珠蛋白基因進(jìn)行過(guò)研究。兩個(gè)組織培養(yǎng)細(xì)胞株用于這些實(shí)驗(yàn)。其中一個(gè)純合是鐮刀型細(xì)胞密碼子6（βS）發(fā)生突變，另一個(gè)純合子則來(lái)源于正常的βB等位...
隨著PCR技術(shù)的發(fā)展，人們?cè)诖嘶A(chǔ)上建立起了一系列基于基因分離的新技術(shù)新方法。如mRNA差別顯示技術(shù)（DDRT-PCR）、以及進(jìn)一步改進(jìn)的代表性差示分析（RAD），抑制性扣除雜交（SSH）和交互扣除R...
對(duì)于某些遺傳病而言，從雙親繼承一個(gè)拷貝的突變基因就足以致病。現(xiàn)在，愛荷華大學(xué)的研究人員證明有可能在沉默一個(gè)基因的突變拷貝的同時(shí)不影響另一個(gè)正常拷貝的表達(dá)。這一發(fā)現(xiàn)表明有一天基因沉默技術(shù)或許可以用于多種...
RNAi是由雙鏈RNA所引起的序列特異性基因沉默。RNAi首先由Fire等發(fā)現(xiàn)于秀麗隱桿線蟲(C.elegans)中,他們發(fā)現(xiàn)將dsRNA注入線蟲體內(nèi)后可抑制序列同源基因的表達(dá),并證實(shí)這種抑制主要作用...
定位克隆（positoinalcloning），又稱圖位克隆（map-basedclonig），1986年首先由劍橋大學(xué)的AlanCoulson提出。用該方法分離基因是根據(jù)功能基因在基因組中都有相對(duì)較...
放射性同位素標(biāo)記的DNA序列測(cè)定分析測(cè)定DNA的核苷酸序列是分析基因結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的前提。從小片段重疊法到加減法、雙脫氧鏈終止法、化學(xué)降解法、自動(dòng)測(cè)序，DNA測(cè)序技術(shù)發(fā)展很快。目前在實(shí)驗(yàn)室手工測(cè)序常用...
一、污染原因(一)標(biāo)本間交叉污染:標(biāo)本污染主要有收集標(biāo)本的容器被污染，或標(biāo)本放置時(shí)，由于密封不嚴(yán)溢于容器外，或容器外粘有標(biāo)本而造成相互間交叉污染;標(biāo)本核酸模板在提取過(guò)程中，由于吸樣槍污染導(dǎo)致標(biāo)本間污染...
1、ESTs與基因識(shí)別EST技術(shù)zui常見的用途是基因識(shí)別，傳統(tǒng)的全基因組測(cè)序并不是發(fā)現(xiàn)基因zui有效率的方法，這一方法顯得即昂貴又費(fèi)時(shí)。因?yàn)榛蚪M中只有2%的序列編碼蛋白質(zhì)，因此一部分科學(xué)家支持首先...
在所有RNA實(shí)驗(yàn)中，zui關(guān)鍵的因素是分離得到全長(zhǎng)的RNA。而實(shí)驗(yàn)失敗的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶廣泛存在而穩(wěn)定，一般反應(yīng)不需要輔助因子。因而RNA制劑中只要存在少量的RNA...
蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的執(zhí)行者，細(xì)胞內(nèi)的生理變化都是通過(guò)蛋白質(zhì)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。但是生命活動(dòng)中各項(xiàng)功能和行為不是由單一的蛋白質(zhì)來(lái)完成的，需要蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)與核酸之間的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的。蛋白-蛋白互作網(wǎng)絡(luò)與轉(zhuǎn)...
極譜法(polarography)通過(guò)測(cè)定電解過(guò)程中所得到的極化電極的電流-電位（或電位-時(shí)間）曲線來(lái)確定溶液中被測(cè)物質(zhì)濃度的一類電化學(xué)分析方法。于1922年由捷克化學(xué)家J.海洛夫斯基建立。極譜法和伏...
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