細(xì)胞簡介：
兔頸動脈平滑肌分離自頸動脈組織；頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈。前者分布至頭頂部和顏面部。后者進(jìn)入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。在發(fā)生時，鰓弓中不形成鰓的下頜弓，所以，從大動脈也不分入鰓動脈和出鰓動脈。從腹大動脈的前方發(fā)出頸外動脈，頸內(nèi)動脈是通向第三鰓弓的血管延伸而形成的，但在某些魚類、有尾兩棲類和爬行類中，這一血管也將一些血液送至大動脈根。其它的高等脊椎動物的大動脈根，在第三、第四大動脈弓之間消失，所以，其第三大動脈弓形成純粹的頸動脈。在相當(dāng)于第三、第四大動脈弓之間的腹行大動脈的部分稱為頸總動脈干（common co-rotid trunk）；高等脊椎動物，是由頸總動脈干分為左、右頸總動脈，然后再各分支為頸外動脈和頸內(nèi)動脈。頸動脈是將血液由心臟輸送至頭、面、頸部的大血管，是腦的主要供血血管之一，由內(nèi)膜、平滑肌層及外膜層構(gòu)成。與其相關(guān)常見疾病為頸動脈狹窄，頸動脈狹窄導(dǎo)致的缺血癥狀主要包括，頭暈、記憶力、定向力減退、意識障礙、黑朦、偏側(cè)面部和/或肢體麻木和/或無力、伸舌偏向、言語不利、不能聽懂別人說的話等。研究頸動脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)，為研究治療頸動脈狹窄提供一個細(xì)胞模型具有重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的大鼠頸動脈血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔頸動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 頸動脈 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8378 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔頸動脈血管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠硝基酪酸()試劑盒 ，英文名： ELISA Kit
Mouse heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒
MouseCoicosterone,COELISAKit 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒分裝
CLIAKitforHumanankyrinB,Ank-BELISAKit人錨蛋白B
細(xì)胞GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitE3大鼠雌三醇
小鼠IgE 英文名稱： immunoglobulin E 英文縮寫： IgE
小鼠IgG 英文名稱： immunoglobulin G 英文縮寫： IgG
小鼠IgM 英文名稱： immunoglobulin M 英文縮寫： IgM
小鼠白介素-1α 英文名稱： ierleukin-1α 英文縮寫： IL-1α
AF750標(biāo)記的磷酸化細(xì)胞核因子抗體
雙甲基精水解酶1抗體
NAALADL1重組小鼠 NAALADL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
半乳糖凝集素1(GAL1)重組蛋白 Recombinant Galectin 1 (GAL1)
ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977) Protein
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FGFR4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (His 標(biāo)簽)
Amyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35 1mgAmyloid Beta 25-35( Beta-Amyloid 25-35) β淀粉樣肽25-35(多肽)
FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽)
NEGR1重組小鼠 NEGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD40 Protein Rat 重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白
AMPK重組人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白 Protein
兔頸動脈血管平滑肌細(xì)胞小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 試劑盒
Human growth hormone releasing peptide ghrELISA Kit 人生長激素釋放肽ghr試劑盒
HumahymosinELISAKit 人肽(Thymosin)試劑盒分裝
Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-P試劑盒人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒
植物細(xì)胞周期G1后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humaumorangiogenesisfactors,TAFELISAKit人血管生長因子(TAF)試劑盒
