小鼠腎臟微血管內皮細胞

| 商品屬性：

| 細胞介紹：

小鼠腎臟微血管內皮分離自腎臟；腎臟是小鼠的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水分及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環境的穩定，使新陳代謝得以正常進行。腎臟內部的結構，可分為腎實質和腎盂兩部分。在腎縱切面可以看到，腎實質分內外兩層：外層為皮質，內層為髓質。腎皮質位于腎實質表層，富含血管，新鮮時呈紅褐色，由一百多萬個腎單位組成。每個腎單位由腎小體和腎小管所構成，部分皮質伸展至髓質錐體間，成為腎柱。腎髓質位于腎皮質的深面，血管較少，色淡紅，為10-20個錐體所構成。腎錐體在切面上呈三角形。錐體底部向腎凸面，向腎門，錐體主要組織為集合管，錐體稱腎乳頭，每一個乳頭有10-20個乳頭管，向腎小盞漏斗部開口。在腎竇內有腎小盞，為漏斗形的膜狀小管，圍繞腎乳頭。腎錐體與腎小盞相連接。每腎有7-8個腎小盞，相鄰2-3個腎小盞合成一個腎大盞。每腎有2-3個腎大盞，腎大盞匯合成扁漏斗狀的腎盂。腎盂出腎門后逐漸縮窄變細，移行為輸尿管。腎單位是腎臟結構和功能的基本單位。腎小體包括腎小球和腎小囊。腎小體內有一個毛細血管團，稱為腎小球，腎小球是個血管球。它由腎動脈分支形成。腎小球外有腎小囊包繞。腎小囊分兩層，兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通。腎小管匯成集合管。若干集合管匯合成乳頭管，尿液由此流入腎小盞。微血管又稱毛細血管。分布于各種組織和細胞間的微細的血管。介于微動脈和微靜脈之間。平均直徑7-9微米，數量極多，成網狀分布。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成，厚約0.5微米?；ね饷嬗斜咏Y締組織，其中有纖維細胞、巨噬細胞和周細胞等。細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔，較粗的毛細血管由2-3個內皮細胞圍成。分布于肌肉組織、神經組織和結締組織中的毛細血管，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃），稱連續毛細血管；分布于內分泌腺、腎臟等處的毛細血管，除有縫隙連接外，細胞本身有許多小孔，（孔徑800-1000埃），稱有孔毛細血管；分布于肝、脾、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管，管腔擴大，稱血竇。毛細血管的管壁薄、通透性大、管徑細（8-10微米）、數量多、血流速度慢，這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所，又稱交換血管。血竇（sinusoid）由毛細血管管腔擴大而成，竇壁的一般結構與毛細血管壁相同，由單層內皮細胞構成，內皮細胞膜上有窗孔。不同器官的竇壁結構各有差別。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙；肝血竇內皮細胞是不連續的，有較寬的細胞隙（0.1-0.5微米）；肝、脾血竇的基膜不完整或無基膜，通透性比毛細血管大，較大的蛋白質和血細胞可以通過。肝血竇壁內有枯否細胞，脾血竇內外有巨噬細胞，這兩種細胞都有吞噬能力，可吞噬清除血液中的異物、細菌等有害物質，是機體單核巨噬細胞系統的重要組成分。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜。

| 方法簡介：

實驗室分離的小鼠腎臟微血管內皮采用膠原酶消化，結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質量檢測：

實驗室分離的小鼠腎臟微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

| 培養信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基：含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：內皮細胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠腎臟微血管內皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

| 細胞培養操作：

1）復蘇細胞：將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現 象發生請及 時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所 需細胞因子 等，確保細胞培養條件*。若由于培養條件不*而導致細胞出現問 題，責任由客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養 4~6 小時,再取出觀察。此時多數細胞均 會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常， 請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4. 靜置細胞貼壁后，請將細胞瓶內的培養基倒出，留 6~8mL 維持細胞正常培養，待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和 技術 部 溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯 系，告知細胞的具體情況，以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細胞僅供科研使用