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生物界的豐富多彩很大程度上取決于嚴(yán)格調(diào)控下的基因的選擇性表達(dá)。高等生物的細(xì)胞內(nèi)約含有105個(gè)不同的基因,而主基因在某個(gè)特定的細(xì)胞中,只有占15%的一小部分表達(dá)。而且在不同的細(xì)胞中,選擇性表達(dá)的基礎(chǔ)也是...
通常所用的PCR方法都在兩個(gè)方面有局限,即目標(biāo)產(chǎn)物程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcusfuriosus)dna聚合酶,具有完整的3’外切酶校讀活性(3’-editing-exonucle...
PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是現(xiàn)代分子生物學(xué)的一個(gè)巨大突破,它能在體外迅速、大量、靈敏地?cái)U(kuò)增基因片段。可是,經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增的大量相關(guān)基因片段如何能有效拼接,卻是一個(gè)很值行探討的問題。傳統(tǒng)的方法是引入...
zui近由于RNA干擾(RNAinterference,RNAi)的發(fā)現(xiàn)使反義領(lǐng)域的研究增多。這種自然發(fā)生的現(xiàn)象zui早是在秀麗線蟲中發(fā)現(xiàn)的(1),是序列特異性地使轉(zhuǎn)錄后的基因沉默的有力機(jī)制。由于zu...
測(cè)序策略目前應(yīng)用的兩種快速序列測(cè)定技術(shù)是Sanger等(1977)提出的酶法及Maxam和Gilbert(1977)提出的化學(xué)降解法。雖然其原理大相徑庭,但這兩種方法都是同樣生成互相獨(dú)立的若干組帶放射...
克服文庫(kù)構(gòu)建的缺陷傳統(tǒng)的cdna文庫(kù)構(gòu)建途徑有許多與生俱來的缺陷:1)cDNA合成不佳,2)連接效率低,3)在限制性酶切過程中造成克隆缺口或者斷裂。任何一種缺陷都有可能造成目的克隆的丟失,尤其對(duì)于低豐...
Vasoactiveintestinalpeptide(VIP)andthestructurallyrelatedpituitaryadenylatecyclase-activatingpolypep...
Caspase是一類對(duì)天冬氨酸特異的半胱氨酸蛋白酶,是與秀麗隱桿線蟲Ced一3具有序列和結(jié)構(gòu)同源性的一個(gè)蛋白家族,在細(xì)胞凋亡執(zhí)行過程中直接參與早期凋亡啟動(dòng)、信號(hào)傳遞及晚期凋亡效應(yīng),除此之外,部分cas...
一、無血清培養(yǎng)基的基本配方:基本成分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí),多數(shù)呈貼壁生長(zhǎng)或兼性貼壁生長(zhǎng);而當(dāng)其在無血清、無蛋白培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),由于缺乏血清中的各種粘...
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.熟悉并掌握Feulgen反應(yīng)的原理及其實(shí)驗(yàn)操作方法2.對(duì)細(xì)胞的免疫組化研究方法有一初步的認(rèn)識(shí)實(shí)驗(yàn)原理自Feulgen等發(fā)明該顯示DNA的Feulgen反應(yīng)法以來,其作用機(jī)制也久經(jīng)研究和討論...
近年來,基于pcr擴(kuò)增的基因診斷技術(shù)備受青睞,細(xì)菌核糖體16S小亞基基因(16SrDNA)鑒定引起了科研人員的廣泛關(guān)注。16SrDNA是細(xì)菌的系統(tǒng)分類研究中zui有用的和zui常用的分子鐘,其種類少,...
1轉(zhuǎn)染前一天將293T細(xì)胞鋪于10cm板,當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%左右即可進(jìn)行PEI轉(zhuǎn)染。2將下列DNA加入一個(gè)已裝有480ul1*HBS(PH7.4)滅菌管混勻三質(zhì)粒系統(tǒng):12ugvector6ugVS...
實(shí)驗(yàn)原理定義:染色體組型又稱核型,是指將動(dòng)物、植物、真菌等的某一個(gè)體或某一分類群(亞種、種、屬等)的體細(xì)胞內(nèi)的整套染色體,按它們相對(duì)恒定的特征排列起來的圖像。核型模式圖是指將一個(gè)染色體組的全部染色體逐...
一、顯微鏡的結(jié)構(gòu)及使用方法?1、光學(xué)顯微鏡的主要構(gòu)造機(jī)械部分照明部分光學(xué)部分?2、光學(xué)顯微鏡的使用方法對(duì)光→置片→低倍→高倍→復(fù)原低倍鏡使用高倍鏡使用?3、使用光學(xué)顯微鏡的注意事項(xiàng)二、酸性蛋白和堿性蛋...
§污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵。預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。§一開始就要十分重視,防止污染,否則會(huì)前功盡棄,不僅浪費(fèi)時(shí)間,而且浪費(fèi)人力、物力,甚至造成無法彌補(bǔ)的損失。(一)污染的類型§細(xì)胞培養(yǎng)過程...
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